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2022.1.11

近日,東北農業(yè)大學(xué)滿(mǎn)朝新教授團隊?將基質(zhì)輔助激光解吸電離飛行時(shí)間質(zhì)譜(MALDI-TOF MS)法與16S rDNA序列分析法,對于乳酸菌鑒定的準確性以及微生物系統分類(lèi)學(xué)相關(guān)分析結果進(jìn)行比較,實(shí)驗結果表明:MALDI-TOF MS法鑒定乳酸菌具備快速、準確的優(yōu)勢,可作為一種快速、簡(jiǎn)便、高效率的微生物鑒定技術(shù),應用于多個(gè)領(lǐng)域之中。

相關(guān)研究已發(fā)表在《中國乳品工業(yè)》期刊上。

乳酸菌(lactic acid bacteria,LAB)是一類(lèi)能利用可發(fā)酵碳水化合物產(chǎn)生大量乳酸的細菌的統稱(chēng),其在自然界分布極為廣泛,且絕大部分都是人體內必不可少的、且具有重要生理功能的菌群。目前,乳酸菌作為國內外常用的益生菌,在我國衛生部2010 年4 月公布的《可用于食品的菌種名單》中,包括6 種雙歧桿菌、14 種乳桿菌、1 種鏈球菌,均屬于乳酸菌。

乳酸菌有著(zhù)十分重要的經(jīng)濟價(jià)值。但由于其屬種較多,為更好的對其分類(lèi),使用快速、可靠的分類(lèi)鑒定方法顯得尤為重要。

目前常用的乳酸菌鑒定方法是16S rDNA 序列分析法,然而該方法存在操作條件要求嚴格、花費時(shí)間較長(cháng)、費用較高的問(wèn)題,極大限制了其鑒定時(shí)效性,無(wú)法滿(mǎn)足乳酸菌快速、廉價(jià)及高通量的鑒定要求。

文章摘要?

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本研究通過(guò)將基質(zhì)輔助激光解吸電離-飛行時(shí)間質(zhì)譜(MALDI-TOF MS)法與16S rDNA序列分析法,對于乳酸菌鑒定的準確性以及微生物系統分類(lèi)學(xué)相關(guān)分析結果進(jìn)行比較,采用MALDI-TOF MS對本實(shí)驗所保藏的3株乳酸菌標準菌株,及由乳制品中分離得到的12株乳酸菌進(jìn)行蛋白質(zhì)譜圖收集,比對譜圖特征峰對其進(jìn)行鑒定及系統進(jìn)行學(xué)分析;同時(shí),進(jìn)行16S rDNA提取并測序,得到分子生物化學(xué)水平鑒定,采用鄰近連接法對16S rDNA序列進(jìn)行系統進(jìn)化樹(shù)分析。

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?結果表明,MALDI-TOF MS法鑒定乳酸菌有著(zhù)快速、準確的優(yōu)勢,可作為一種快速、簡(jiǎn)便、高效率的微生物鑒定技術(shù),應用于多個(gè)領(lǐng)域之中。經(jīng)MALDI-TOF MS與16S rDNA測序對試驗所用的15株乳酸菌鑒定,乳桿菌屬的2株微生物種水平鑒定結果存在偏差,其他13株鑒定結果一致;兩種方法所得到的數據均可得出聚類(lèi)熱圖及系統發(fā)育樹(shù),可確定為同一科水平,不同屬種水平微生物親緣距離與位置有一定差異。

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山東省青島市高新區松園路17號青島市工業(yè)技術(shù)研究院D區D2樓

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北京市北京經(jīng)濟技術(shù)開(kāi)發(fā)區涼水河二街8號院13號樓A座4層

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